克氏錐蟲(chóng)免疫熒光試劑盒（IFA）

產(chǎn)品名稱(chēng)：克氏錐蟲(chóng)免疫熒光試劑盒（IFA），檢測(cè)人血清/血漿抗腺病毒抗體IgG/IgM的間接免疫熒光檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)介：克氏錐蟲(chóng)（Trypanoma cruzi Chagas,1909），又譯枯氏錐蟲(chóng)，屬人體糞源性錐蟲(chóng)，是克氏錐蟲(chóng)病，或稱(chēng)恰加斯?。–hagas' disease）的病原體，傳播媒介為椎蝽。本蟲(chóng)主要分布于南美和中美，故又稱(chēng)美洲錐蟲(chóng)病。

測(cè)試原理：IFA方法是基于樣品中抗體的反應(yīng)，用吸附在滑動(dòng)表面上的抗原進(jìn)行測(cè)試。樣品中的特異性抗體與抗原發(fā)生反應(yīng)，而不與抗原結(jié)合的免疫球蛋白在洗滌步驟中被除去。下一步，抗原抗體復(fù)合物與熒光素標(biāo)記的抗人球蛋白反應(yīng)。它可以用免疫熒光顯微鏡檢查。

試劑盒的特點(diǎn)：除PBS外，所有試劑均已備好使用。所有這些試劑有一個(gè)便于識(shí)別的號(hào)碼。在分析過(guò)程中，每一步使用的試劑的用量都表明了。

試劑盒內(nèi)容（詳情請(qǐng)參考英文原版）：

1、腺病毒玻片：玻片的腺病毒10的10威爾斯，涂腺病毒感染Hep-2細(xì)胞，腺樣體71株（ATCC VR-1），甲醛處理，丙酮固定和混合與非感染細(xì)胞。

2、PBS：1瓶PBS pH 7.2粉重建與蒸餾水1升。

3、腺病毒IgG陽(yáng)性對(duì)照：200µL陽(yáng)性對(duì)照血清，含疊氮鈉。

4、腺病毒陰性對(duì)照：陰性對(duì)照血清200µL，含疊氮鈉。

5、g抗-人IgG FITC共軛：2瓶1.1毫升的熒光素標(biāo)記的抗人IgG熒光共軛在含Evan´s blue的磷酸鹽緩沖液，*和蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑。

6、安裝介質(zhì)：安裝介質(zhì)3 mL緩沖甘油，含有*。

1、 ADENOVIRUS SLIDE: 10 slides of 10 wells each, coated with HEp-2 cells infected with adenovirus, Adenoid 71 strain (ATCC VR-1), formaldehyde treated, acetone fixed and mixed with non-infected cells.

2 、PBS: 1 vial of PBS pH 7.2 powder to reconstitute with 1 l of distilled water.

3 、ADENOVIRUS IgG POSITIVE CONTROL: 200 µl of positive control serum, containing sodium azide.

4 、ADENOVIRUS NEGATIVE CONTROL: 200 µl of negative control serum, containing sodium azide.

5、G ANTI-HUMAN IgG FITC CONJUGATE: 2 vials with1.1 ml of fluorescein-labeled anti-human IgG fluorescein conjugate in a phosphate buffer containing Evan´s blue, sodium azide and a protein stabilizer.

6 、MOUNTING MEDIUM: 3 ml of mounting medium: buffered glycerol, containing sodium azide

所需材料，但不提供：

足夠的精密微量。

經(jīng)恒溫處理孵化器。

蒸餾水。

24x60毫米蓋玻片。

熒光顯微鏡及相應(yīng)的濾光片

´制造商的建議。

潮濕的室

存儲(chǔ)要求：

按建議的溫度存儲(chǔ)。不要使用超過(guò)保質(zhì)期的試劑盒。只有當(dāng)試劑被封上并儲(chǔ)存在的溫度時(shí)，才會(huì)有效。

試劑的穩(wěn)定性和操作：

在無(wú)菌條件下處理試劑以避免微生物污染物。

只使用需要測(cè)試的PBS，控制血清和共軛溶液的數(shù)量。不要把多余的溶液倒進(jìn)瓶子里。重組后，儲(chǔ)存PBS在2-8ºC中，如果有濁度出現(xiàn)，請(qǐng)停止使用。

標(biāo)本采集與處理：

無(wú)菌采集血液必須使用靜脈穿刺技術(shù)。無(wú)菌或無(wú)菌技術(shù)的使用將保持標(biāo)本的完整性。

血清/血漿樣品被冷藏（2-8ºC）在收集或冷凍（20ºC）如果在7天內(nèi)完成測(cè)試，不能。樣品不應(yīng)反復(fù)冷凍和解凍。不要使用高脂血、溶血、污染樣本。含有顆粒的樣品應(yīng)通過(guò)離心澄清。該試劑盒適合于血清或血漿使用。

試劑的初步制備：

只有PBS必須事先準(zhǔn)備好。將小瓶2的含量添加到1升蒸餾水中。搖勻直至*溶解。一旦稀釋?zhuān)４嬖?/span>2-8ºC。

局限性：

1、此試劑盒用于與人血清/血漿結(jié)合使用。

2、該工具包的用戶(hù)建議仔細(xì)閱讀和理解包插入。為了獲得可靠的測(cè)試結(jié)果，必須嚴(yán)格遵守該協(xié)議。特別是，正確的樣品和試劑的加樣，隨著孵育步驟仔細(xì)清洗和時(shí)機(jī)是*的準(zhǔn)確的結(jié)果。

3、樣品的結(jié)果應(yīng)與臨床評(píng)價(jià)和其他診斷程序結(jié)合使用。隔離技術(shù)應(yīng)作出明確診斷。

4、此測(cè)試不會(huì)顯示感染部位。它并不打算取代孤立。

5、抗體水平的顯著升高并不排除感染可能性。

6、在感染過(guò)程中很早采集的樣本可能沒(méi)有檢測(cè)到IgG水平。在這種情況下，建議進(jìn)行IgM檢測(cè)，或第二次血清樣本，14至21天后，與原樣品平行測(cè)試，以確定血清轉(zhuǎn)換。

7、由于孕婦IgG在分娩前被動(dòng)地從母體傳遞到胎兒，因此必須謹(jǐn)慎地對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。IgM檢測(cè)通常是6個(gè)月以下兒童感染的有用指標(biāo)。

8、單一樣本抗體測(cè)定結(jié)果不應(yīng)用于診斷zui近感染。配對(duì)樣本（急性期和恢復(fù)期）應(yīng)同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，以尋找血清轉(zhuǎn)換或抗體水平顯著上升。

9。自身免疫病患者的樣本在使用IFA時(shí)可能會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。不能用這種方法對(duì)那些樣品進(jìn)行評(píng)估。

10。性能測(cè)試結(jié)果顯示對(duì)應(yīng)于商業(yè)預(yù)測(cè)設(shè)備的比較研究在一個(gè)確定的人口樣本。小的差異可以發(fā)現(xiàn)，不同群體或不同的預(yù)測(cè)裝置。

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