偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
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臨床意義
      豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測(cè)豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。

操作程序
1.洗滌液配制：使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右）,并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解（在37℃水中加熱5-10），然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋?zhuān)♂尯玫南礈煲涸?℃可以存放7天。
2.樣本稀釋?zhuān)河脴颖鞠♂屢海?號(hào)液）將待檢血清按1:40稀釋?zhuān)缛?ul血清與195ul樣本稀釋液，充分混勻；注意：陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照也按1：40稀釋。

3.加樣反應(yīng)：取出所需反應(yīng)板條，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔，每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30分鐘。甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板5次，200μl/孔，每次靜置3分鐘倒掉，再在干凈吸水紙上拍干。
4.加酶反應(yīng)：每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴（100μl），置37℃溫育30分鐘。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5.顯色反應(yīng)：每孔先加底物（3號(hào)液）一滴（50µl）、再加顯色劑（4號(hào)液）一滴（50µl），混勻，室溫（18℃-25℃）避光顯色10分鐘。每孔加終止液（6號(hào)液） 1滴（50μl），10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果（檢測(cè)前在震蕩器上輕輕震動(dòng)一下）。

結(jié)果判斷
       在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630值，試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔OD630值應(yīng)≥0.8，陰性對(duì)照孔OD630值平均值必須低于0.3。 樣品孔OD630值大于0.33，判為陽(yáng)性；樣品孔OD630值小于0.30，判為陰性, 樣品OD630值在0.30到0.33之間，判為可疑。

注意事項(xiàng)
      1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
      2.待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí)，應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測(cè)血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板， 使反應(yīng)時(shí)間*。
     3.濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋?zhuān)绻l(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

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